Vesna Mastilović rođena je 13. jula 1960. godine u Zemunu. Diplomirala je na Pravnom fakultetu Univerziteta u Beogradu 17. decembra 1984. godine. Pravosudni ispit je položila 27. januara 1987. godine.

Nakon završenih studija pripravnički staž obavila je u advokatskoj kancelariji i u tadašnjem Okružnom privrednom sudu u Beogradu u periodu od 11. novembra 1985. godine do 26. januara 1987. godine. Nakon položenog pravosudnog ispita 27. januara 1987. godine, nastavila je da radi u sudu na radnom mestu stručnog saradnika u parničnom odeljenju i odeljenju privrednih prestupa.

Izabrana je na sudijsku funkciju u Petom opštinskom sudu u Beogradu 19. jula 1994. godine, na koju funkciju je stupila 1. avgusta 1994. godine, gde je postupala u predmetima parnične materije.

U periodu od 1. januara 2010. godine do 25. juna 2015. godine obavljala je sudijsku funkciju u Prvom osnovnom sudu u Beogradu u parničnom odeljenju.

Odlukom Visokog saveta sudstva od 9. juna 2015. godine izabrana je za sudiju Apelacionog suda u Beogradu, na koju funkciju je stupila 26. juna 2015. godine, gde je postupala u građanskoj materiji, a od januara 2021. godine predsednik je veća.

Na funkciji sudije Vrhovnog suda je od 23. avgusta 2023. godine.

Sudija je u građanskoj materiji.